Abstrakt

Rośliny konopi są podatne na skażenie mikrobiologiczne, w tym grzyby wytwarzające szkodliwe mykotoksyny. Obecność tych toksyn w produktach konopnych stanowi poważne zagrożenie dla zdrowia, zwłaszcza w przypadku stosowania ich w celach medycznych u osób z obniżoną odpornością. W niniejszym badaniu oceniono obecność grzybów i mykotoksyn w suszonych pąkach konopi po napromieniowaniu promieniami gamma, stosując techniki hodowlane, PCR/qPCR i ELISA. Napromieniowanie znacząco zmniejszyło liczbę grzybów i bakterii, eliminując bakterie nadające się do hodowli, ale nie doprowadziło do całkowitej sterylizacji. Żywe zarodniki toksygennych rodzajów grzybów, takich jak Aspergillus, Penicillium i Fusarium, przetrwały. Sekwencjonowanie amplikonów ITS wykazało dominujące grzyby mykotoksygenne w próbkach nienapromieniowanych (NR), napromieniowanych (IR) i pochodzących od licencjonowanych producentów (LP), podczas gdy sekwencjonowanie nowej generacji (NGS) ujawniło dodatkowe nienadające się do hodowli gatunki toksygenne. Metoda PCR/qPCR wykryła geny biosyntetyczne dla aflatoksyn, trichotecenów, ochratoksyn i deoksyniwalenolu we wszystkich próbkach, przy czym liczba kopii genów pozostała stabilna po napromieniowaniu, co sugeruje uszkodzenie DNA bez jego pełnej degradacji. Test ELISA potwierdził obecność aflatoksyn, ochratoksyn, DON i toksyn T2 w próbkach IR i LP w zmiennych stężeniach. Chociaż próbki LP wykazywały niższą liczebność drobnoustrojów i genów, nadal wykrywano resztkowe DNA i toksyny. Nasze badanie pokazuje, że chociaż napromieniowanie zmniejsza liczbę drobnoustrojów, nie eliminuje całkowicie grzybów toksynogennych ani ich metabolitów. Zapewnienie bezpieczeństwa produktów konopnych wymaga wieloaspektowej oceny, która obejmuje techniki kulturowe, molekularne i immunologiczne, równolegle z bardziej rygorystycznymi standardami mikrobiologicznymi na etapie produkcji.