Całkowite poziomy drożdży i pleśni (TYM) w kwiatostanach Cannabis sativa (konopie indyjskie) o wysokiej zawartości THC są regulowane w celu zapewnienia, że ​​użytkownicy medyczni i rekreacyjni, zwłaszcza ci z obniżoną odpornością, nie są narażeni na potencjalnie szkodliwe poziomy. W Ameryce Północnej narzucone limity wahają się od 1000–10 000 cfu/g produktu suszonego do 50 000–100 000 cfu/g, w zależności od jurysdykcji. Czynniki wpływające na gromadzenie się TYM w kwiatostanach konopi nie były wcześniej badane. W tym badaniu przebadano >2000 świeżych i suszonych próbek pod kątem TYM w okresie 3 lat (2019–2022), aby zidentyfikować konkretne czynniki, które mogą przyczyniać się do poziomów TYM. Kwiatostany wyhodowane w szklarni pobrano przed i po zbiorach komercyjnych, homogenizowano przez 30 s i umieszczono na agarze ziemniaczano-dekstrozowym (PDA) z dodatkiem 140 mg/l siarczanu streptomycyny. Jednostki tworzące kolonie (cfu) oceniono po 5 dniach inkubacji w temperaturze 23°C przy świetle 10–14 h. PDA zapewniło bardziej spójne wyniki pod względem liczby cfu w porównaniu z agarami Sabouraud z dekstrozą i trypsyną sojową. Dominującymi rodzajami grzybów zidentyfikowanymi metodą PCR regionu ITS1-5.8S-ITS2 rDNA były Penicillium, Aspergillus, Cladosporium i Fusarium. Ponadto odzyskano cztery rodzaje drożdży. Łącznie 21 gatunków grzybów i drożdży stanowiło całkowitą liczbę cfu obecną w kwiatostanach. Zmiennymi, które istotnie (p < 0,05) zwiększyły te poziomy TYM w kwiatostanach były: uprawiany genotyp (szczep), obecność ściółki liściowej w szklarni, aktywność pracowników podczas zbioru, genotypy o większej obfitości tkanek znamionowych i liści kwiatostanu, wyższa temperatura i wilgotność względna w mikroklimacie kwiatostanu, pora roku (maj–październik), metoda suszenia pąków po zbiorze i niewystarczające suszenie pąków. Zmiennymi, które istotnie (p < 0,05) zmniejszyły TYM w próbkach były: genotypy o mniejszej liczbie liści kwiatostanu, cyrkulacja powietrza uzyskana przez wentylatory podczas dojrzewania kwiatostanu, zbiór w okresie listopad–kwiecień, suszenie całych łodyg kwiatostanu i suszenie do zawartości wilgoci 12–14% (aktywność wody 0,65–0,7) lub niższej, co było odwrotnie skorelowane z poziomami cfu. W tych warunkach większość suszonych próbek komercyjnego konopi zawierała <1000–5000 cfu/g. Nasze ustalenia wskazują, że TYM w kwiatostanach konopi jest wynikiem dynamicznej interakcji między genotypem, środowiskiem i metodami postępowania po zbiorach. Niektóre z tych czynników mogą być zmieniane przez producentów konopi w celu zmniejszenia potencjalnego gromadzenia się tych drobnoustrojów. Spośród 21 gatunków grzybów i drożdży odzyskanych z kwiatostanów konopi uprawianych w szklarniach, kilka może stanowić potencjalne zagrożenie dla zdrowia ludzi, podczas gdy wiele nie i może zapewniać korzystne interakcje w roślinie konopi. Obecnie zalecane metody posiewu na podłoża agarowe i enumeracja całkowitej liczby cfu nie są w stanie odróżnić tych dwóch grup.